操作程序

LC-MS标准操作规程

1、准备工作：

各部件的准备操作：

气体：

保证高纯氮气和高纯氦气存量足够，与仪器连接正常，并无泄漏现象。

氮气:Highpurity(>99%)氮气

气体压力：690±140kPa(100±20psi),0.4~0.6MPa

氦气:Ultra-highpurity(>99.995%)，超高纯氦气(>99.995%)

气体压力：135±70kPa(20±10psi),<0 .15mpa

真空：

convectronpressure0.9–1.1Torr;

iongaugepressure1.0-1.5x10-5Torr

溶剂：

使用如图标准试剂：

混合的有机/水相溶剂系统使用的有机溶剂包括甲醇，乙腈和异丙醇优于单纯的水相溶剂系统。挥发性的酸或碱比较适于ESI，不建议使用高于100mM的盐溶液。而强的无机酸或碱对仪器是非常有损害的。

获得好的电喷雾的规则如下：

a．溶液系统不使用非挥发性的盐和缓冲液。如避免使用钠盐，钠盐和磷酸盐。必要时使用铵盐。

b．使用有机/水相溶剂系统和使用挥发性的酸和碱。

c．尽可能优化你感兴趣的分析样品的溶剂系统的pH，如果你的样品带有一个或多个氨基，流动相应稍微偏酸（pH2-5），酸性pH会保持溶液中离子的正电状态。

硬件检查：

检查石英毛细管，或者金属毛细管切口和位置。

检查样品进入质谱的连接方式：

校正需要直接连接柱塞泵。

调谐或者做样则可使用LC或者注射泵引入样品。

检查总开关及电子开关：

如图所示，首先打开总开关。此时真空泵自动开启，几分钟后涡轮分子泵开始运作。本仪器需要真空度较高，应先开启总开关10小时以上（建议长时间未使用质谱应开启过夜）再打开电子开关，保证仪器内部真空度达到要求并避免真空灯不断点燃，损耗寿命。如果短时间不用则总开关保持开启状态，维持系统内部真空。

检查真空泵检查泵油高度和质量如果需要的话，添加泵油。每两周需要给机械泵震气。

检查室温是否维持在18~25℃。

2、面板操作指南：

2.1、开机程序

保证真空泵工作10小时以上，开启电子开关。前面板指示灯亮起，

打开电脑，Power，Vacuum，Communication应显示绿色。开机完成。

3、关机及注意事项：

3.1.1液相关机：

样品分析完成后，应首先关闭检测器的灯，以减少灯能量的损失；其次，根据流动相的组成选择纯甲醇或在5%甲醇水溶液除盐后以纯甲醇进行清洗（连续使用情况下每日至少清洗30分钟以上时间，非连续使用应增长清洗时间，具体以相关的样品为参考；含盐流动相至少以5%甲醇水溶液清洗45分钟以上后，逐步改换到纯甲醇清洗）；再者，选择自动进样器清洗或以先纯水后甲醇的方式用专用接头对手动进样阀在Load位进行清洗，完成后扳至Inject位用清洗液充填管道；上述工作完成后再将柱温箱关闭或降至室温。

3.1.2质谱关机：

A.短时间不用（2-3星期）：

用10%-100%甲醇梯度洗脱，根据柱子内径确定流速（2.1mm200ul/min）冲洗20分钟以上。然后点击standby，下下离子源，用无尘纸轻轻擦拭干净后再安装好离子源。然后关闭电子开关。保持总电源开关处于打开状态。

B．长时间不用和做完校正后：

1.点击On/Standby钮使质谱仪处于Standby模式.此时，FinniganLTQ质谱仪关闭鞘气，辅助气，吹扫气，ESI高压和注射泵。质谱仪停止扫描，并冻结了SpectrumandGraph

views（质谱和坐标图查看）页面的显示。警告。你在打开API源接触空气中的氧气以前，一定让质谱仪处于Standby模式。在质谱仪处于打开状态时，若离子源内有空气是不安全的。（在你打开离子源时，FinniganLTQ质谱仪会自动关闭，但你最好考虑到这个警告。

2.等待温度降低至150度后，关闭白色电子开关。

3.关闭总开关，氮气及氦气开关。

3.1.3注意事项：

A、新柱子活化时最好断开检测器管道直接排除清洗液；

B、一次开灯相当于30小时灯寿命，因此建议尽可能将样品集中分析；遇有样品分散的情况，且间隔时间不超过8小时，建议不要关灯；

C、仪器运行过程中尽是避免再仪器上使用USB设备；

D、对于电子追踪记录中的错误信息一定要及时分析原因并排除；

E、软件运行过程中不可将加密狗拔下；

F、注意计算机的防毒；

G、单独Sequence中的样品尽量不超过200，过多会相起系统内存紧张；

H、对样品的仪器方法（Program）更新后，应及时对“Program”文件夹中储存的方法进行同步更新；

I、不要对同一样品打开多个窗口，否则会引起数据读写错误；

J、样品数据应定期进行备份，以减少系统问题造成的数据安全影响。

K、每周：

检查泵油高度和质量

如果需要的话，添加泵油

如果仪器使用率很高（一天运行24小时），可以计划每周一次清洗APIStack(包括金属毛细管，Skimmer，TubeLense)

机械泵震气

每月

检查氦气钢瓶压力和检漏

检查氮气供应

检查LCQ的校正，如果需要可以重新校正

检查空气滤膜，必要可做清洗

每三个月

做全面的仪器校正；更换泵油。

L、禁止使用不挥发的盐做为流动相。